摘要:α-酰胺酶(α-amidase,α-AE)催化神经和内分泌系统中活性多肽的C-端酰胺化,对多肽的生物活性至关重要。以大鼠心房组织的总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增获得编码α-酰胺酶的cDNA,并进行了克隆和测序。为了使α-酰胺酶能在链霉菌中分泌表达,将其cDNA与链霉菌酪氨酸酶(melC1)信号肽的编码序列融合得到融合基因mel/AE,将mel/AE插入链霉菌质粒pIJ680,获得重组质粒pIJ-mel/AE680。SDS-PAGE和生物活性测定证实,携带pIJ-mel/AE680的重组菌株S.lividans TK54[pIJmel/AE680]能分泌表达α-酰胺酶。