IL-1018-57-PE40高效表达、纯化及细胞活性之研究

摘要:

以IL-10的功能短肽（40肽，即IL-10第18号至57号氨基酸）为导向部分与PE40（绿脓杆菌外毒素除去受体结合区后的剩余部分）融合分别构建了IL-10_18-57-PE40的胞质和胞周质表达质粒，其中，IL-10_18-57-PE40在Rosettablue(DE3)中以高效胞质可溶形式表达，在BL21（DE3）pLysS中以胞周质分泌形式表达；表达宿主菌Rosettablue(DE3)超声波破碎后，依次通过硫酸铵盐析、疏水层析、铜离子亲和层析、阴离子交换层析纯化后，得96%重组毒素纯品；细胞活性实验、细胞ELISA和荧光标记实验表明，构建的IL-10_18-57-PE40符合免疫毒素的作用机理。因此，该实验为PE免疫毒素的规模制备和纯化做了一定的有益的探索。

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