双启动子对重组溶源性枯草杆菌中外源蛋白表达的增强作用

摘要:

探讨了双启动子对基于溶源性噬菌体构建的重组枯草杆菌中外源蛋白表达的影响。分别将不含或含有本身启动子的α-淀粉酶基因 (来源于Bacillus amyloliquefaciens) 和青霉素酰化酶基因 (来源于Bacillus megaterium)克隆到溶源性枯草杆菌中，得到重组菌B. subtilis AMY1, B. subtilis AMY2, B. subtilis PA1以及B. subtilis PA2。由于同源重组，所克隆的片段整合到溶源性枯草杆菌中的噬菌体基因组上，并处于噬菌体强启动子的下游。在重组菌AMY1和PA1中，在热诱导的情况下外源基因的转录只受到噬菌体启动子的作用，而在重组菌AMY2和PA2中，在热诱导下外源基因的转录同时受到噬菌体启动子和基因本身所带启动子的作用。双启动子的应用使重组α-淀粉酶的表达量提高了133%，使重组青霉素酰化酶的表达量提高了113%。

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