真养产碱杆菌聚羟基烷酸合成酶基因在欧文氏菌中的表达

摘要:

将含有真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)合成聚羟基烷酸(PHA)基因(phaCA3)的质粒pTZl8U—PHB改造成为具有卡那霉素抗性的质粒pJMCl．并以电击法将pJMCl引入利用碳源广泛的胡罗卜软腐欧文氏茵(Erwinia carotovora)非致病菌系(Eccl3B)中，phaCAB可获得高效表达，膨大的转基因菌[Eccl3B(pJMCl)]细胞内几乎充满PHA颗粒。以蔗糖为碳源，初步在5L发酵罐中对转基因菌进行分批补料培养35h，菌体干重达28g／L,PHA占菌体干重的68％，具有生产潜力。将该菌合成的PHA提取纯化(纯度达99％)后，进行核磁共振分析，发现它只有单一的聚-β-羟基丁酸(PHB)组分。

Abstract: