重组恶性疟原虫DNA质粒免疫小鼠及抗原表达的调控

摘要:

将恶性疟原虫MSP1-31基因序列，引入四环素(Tc)控制的真核表达载体pTRE，获得重组质粒pTRE-31。将MSP1-31的原核表达载体pDS56T1转化大肠杆菌表达MSP1-31，亲和纯化后作检测用抗原。pTRE-31与辅助质粒pTet-off(tTA)肌肉注射4周龄BALB/c小鼠，观察DNA介导免疫情况。结果显示，四环素饲喂的小鼠4周时血清抗体阳转率为7.1%(1/14)，而不饲喂四环素组可达100%(14/14)，表明用pTRE-31/pTet-off重组质粒组合直接注射小鼠有效地引发了针对疟原虫MSP1-31抗原的体液免疫反应，且可受控于四环素。不饲喂四环素组小鼠在12周后仍能维持抗体阳性，倍比稀释ELISA显示血清抗体滴度在4周、8周和12周内持续上升。饲喂四环素组小鼠4周后停止饲喂Tc，第8周和第12周检测仍有部分(60%)小鼠血清抗体阳转，而继续饲喂Tc的小鼠未有抗体阳转，暗示重组质粒DNA在小鼠体内可持续存在至少4周并仍具备表达功能。

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