大肠杆菌原核增强子样序列的克隆及其结构与功能的研究

摘要:

利用氯霉素乙酰转移酶(cat)以及β-半乳糖苷酶(lacZ)基因作为报告基因，从大肠杆菌MC1061株染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列——MC2，MC8，MC9，这3个片段均具有正反向增强活性，对β-半乳糖苷酶基因的增强活性(正向)在2～5.5倍之间。采用体内转录，RNA Dot blot杂交的方法对MC8的功能进行了研究，结果表明，MC8片段对于基因表达的调控发生在转录水平上。用核酸外切酶III末端缺失的方法对MC8的功能区进行了定位。结果显示，MC8的功能区位于距其正向克隆5′端450～950bp长约500bp的区段内。在450～600bp以及840～950bp区段内至少分别含有一个功能位点。序列分析的结果表明，MC8功能区有3个AT丰富区，其中2个分别位于450～600bp以及840～950bp区段内。

Abstract: