以人胎肝为材料,通过RT-PCR的方法扩增出人促红细胞生成素受体(hEpoR)的胞外区基因。将获得的成熟受体胞外区基因起始密码子改构后克隆到原核表达载体pBV220中,进行原核温控诱导表达。表达产物经蛋白N端测序及Western-blot实验证实表达产物是hEpoR胞外区蛋白。利用上罐发酵培养获得的包涵体蛋白经复性纯化后,体外生物学活性检测表明表达产物可特异地抑制TF-1细胞在Epo刺激下的生长,证实了复性表达产物具有人促红细胞生成素受体胞外区结合Epo的生物活性。
张映辉 卢一凡 刘一平 邓继先. 人促红细胞生成素受体胞外区基因的克隆及其在大肠肝菌中的表达[J]. 生物工程学报, 2000, 16(3):
通信地址:中国科学院微生物研究所 邮编:100101
电话:010-64807509 E-mail:cjb@im.ac.cn