枯草蛋白酶E的定点突变及其对酶性质的影响

摘要:

用定点突变的方法研究S221C/P225A，N118S/S221C/P225A，D60N/S221C/P225A和Q103R/S221C/P225A突变对蛋白酶活性，酯酶活性与蛋白酶活性之比的影响。结果表明：S221C/P225A突变使蛋白酶活性比枯草蛋白酶E低73000多倍，酯酶活性与蛋白酶活性之比是Subtiligase的3倍；N118S/S221C/P225A突变使蛋白酶活性和酯酶活性分别比S221C/P225A突变下降3.6倍和15倍，酯酶与蛋白酶活性之比下降4倍，同时增加变体酶的热稳定性；D60N/N118S/S221C/P225A突变使蛋白酶活性比N118S/S221C/P225A突变体下降15倍，但对酯酶活性几乎没有影响，酯酶与蛋白酶活性之比增加14倍，分别是S221C/P225A突变体和Subtiligase的3.3倍和10.3倍；但是，Q103R/N118S/S221C/P225A突变使蛋白酶活性比N118S/S221C/P225A突变体增加5倍，酯酶活性下降55倍，酯酶与蛋白酶活性之比下降1000倍。

Abstract: