黄瓜花叶病毒cDNA载体在烟草细胞中表达外源基因

摘要:

为了探讨利用黄瓜花叶病毒(CMV)构建表达载体的可行性，分离了山东株(SD) CMV RNA 3的全长cDNA。测定其全序列后，采用定点突变的方法在衣壳蛋白(CP)基因起始密码子处改造出一个NsiⅠ位点，可将外源基因引入NsiⅠ位点和CP基因终止密码子上游附近的XhoⅠ或SalⅠ位点而置换掉CP基因。分别用绿色荧光蛋白(GFP)基因、β-葡糖醛酸酶(GUS)基因以及小鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)基因3种报告基因置换CP基因。将Fny株CMV RNA 1、RNA 2和SDCMV嵌合RNA 3的cDNA分别插入pCass载体的35S启动子和终止子之间，将构建的置换型载体直接以质粒的方式转染烟草原生质体，表达了3种报告基因。

Abstract: