丙型肝炎病毒基因组C区、NS3区、NS4区基因的融合、表达及初步应用

摘要:

通过PCR技术从HCV全长基因组中扩增并克隆到Core区、NS4区的部分优势表面抗原肽的基因和C33a基因。再将它们以Core\,CC3c\,NS4的顺序和C33c、NS4的顺序分别拼接融合成融合抗原CCN、CN。片段之间以Gly-Gly-Gly-Gly柔性连接肽连接。经核苷酸序列分析表明，拼接点序列正确。将融合抗原CN、CCN基因分别克隆至T7启动子控制下的表达质粒PET24(a)+,PET22(b)+中，转化至大肠杆菌BL21(DE3)后，经IPTG诱导可高表达分子量约为43kD、58kD的融合抗原，表达产物以包涵体形式存在。表达产物经Ni²⁺IDA亲和柱纯化后，并对融合抗原CN、CCN的抗原性做了初步的鉴定。

Abstract: