以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础,采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(VH)和轻链(L),以重链恒定区1(CH1)5′端12个氨基酸的序列作为连接肽,并将连接肽中的Lys突变为Ser,构建VH连接肽-L三结构域单链抗体。重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达,其表达量占菌体总蛋白质的20%。表达的蛋白质在菌内形成包含体,经凝胶过滤法复性,获得了有抗原结合活性的VH/L。该三结构域单链抗体的成功构建和复性,为重组抗体片段的研制提供了借鉴。
吴小平 杨东玲 张志强 阎锡蕴. 抗肿瘤血管三结构域单链抗体VH/L的构建与表达[J]. 生物工程学报, 2001, 17(1):
通信地址:中国科学院微生物研究所 邮编:100101
电话:010-64807509 E-mail:cjb@im.ac.cn