利用小鼠HPRT基因组DNA片段和人工合成的含有FLP重组酶识别位点变异体FRT和F3RT序列的寡核苷酸 ,构建了针对小鼠HPRT基因位点的置换型打靶载体pSP HPRT Fneo F3。经过限制酶酶切及部分测序鉴定其结构正确后 ,将线性化了的打靶载体以电穿孔法导入ES细胞内 ,经G418和 6 -TG双药筛选和分子鉴定 ,得到了 2个在HPRT位点整合有FLP重组酶“交换盒”F Neo F3结构的双交换重组ES细胞克隆 ,为建立基于FLP重组酶介导的盒式交换的高效、定点转基因体系创造了条件.
郑敬民; 李坚; 傅继梁;. 含FLP“交换盒”结构的打靶载体构建及ES细胞打靶研究[J]. 生物工程学报, 2001, 17(5):
通信地址：中国科学院微生物研究所 邮编：100101
电话：010-64807509 E-mail：cjb@im.ac.cn
