合成酮内酯类3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B糖多孢红霉菌M的构建

摘要:

大环内酯类抗生素基因工程是近年来研究的一个新领域，迄今已合成了100多种新的聚酮类化合物。以糖多孢红霉菌A226基因组DNA为模板，用重叠PCR方法扩增出去除KR6酶域DNA的约32kb DNA片段，克隆于pWHM3载体，构建了同源重组质粒pWHM2201。PEG介导原生质体转化法将pWHM2201转入糖多孢红霉菌A226，并整合于染色体红霉素合成基因位点。整合体在R3M斜面上生长两代后，制备原生质体涂R3M平皿。利用PCR鉴定筛选出8株KR6敲除的突变体糖多孢红霉菌M(1-8)。ZabsPec Fab质谱鉴定，证实糖多孢红霉菌M1合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B，一种新的酮内酯类化合物。 〖HJ0

Abstract: