胰腺组织表达Cre重组酶转基因小鼠的建立及鉴定

摘要:

组织特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠是进行组织特异性基因剔除研究的重要工具。为了建立胰腺组织特异性Cre转基因小鼠，我们通过PCR克隆了大鼠胰岛素基因启动子，并用它指导Cre基因在胰岛细胞中的特异性表达。在Cre重组酶基因5′端添加了真核核糖体结合序列和核定位序列以使Cre重组酶能穿越核膜在细胞核中发挥功能；同时，在Cre基因3′端添加了含内含子的3′端人生长激素基因。表达载体经显微注射导入小鼠受精卵以建立转基因小鼠。PCR检测显示共获得7只Cre整合阳性的转基因首建者小鼠；RTPCR结果表明其中1只首建者小鼠的子代鼠在胰腺中转录了外源基因，进一步的Southern杂交结果表明，该转基因小鼠能够在胰腺中表达有功能的Cre重组酶。 

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