重组人sBLyS表达纯化条件的优化、理化特征及生物功能研究

摘要:

构建了原核表达质粒p ET-30a(+)/sBLyS，转化大肠杆菌BL21(λDE3)，IPTG诱导表达的重组蛋白以可溶部分和包涵体两种形式存在，为了提高可溶部分重组蛋白的比例，确定16℃为诱导表达的温度，最佳表达时间为12h。在此条件下大规模诱导表达，经Ni²⁺亲和层析获得重组人sBLyS。重组蛋白的等电点约为7.1～7.3，活性状态时是非共价连接的同源三聚体。MTT法测重组人sBLyS对B淋巴细胞的增殖作用结果表明，B细胞经抗IgM原血清活化后，它的增殖程度在一定的重组人sBLyS浓度范围内随其浓度的增加而提高，sBLyS刺激时间对B细胞增长也有显著影响，sBLyS以2μg/mL刺激3d B淋巴细胞的增殖达最大。

关键词:重组人sBLyS， 纯化， 同源三聚体， 细胞增殖

Abstract:

Key words:重组人sBLyS， 纯化， 同源三聚体， 细胞增殖