DNA错配修复基因mutS的高效表达及表达产物活性鉴定

摘要:

将DNA错配修复基因mutS（2.56kb）克隆于分泌型原核表达载体pET32a（+）上，以N端融合6个组氨酸的形式在E.coliAD494(DE3) 中进行了IPTG诱导表达。SDSPAGE分析证实有一与预期分子量相应的诱导表达条带，其表达量占全菌蛋白质的35％左右，且表达蛋白以可溶形式存在。利用固定化金属离子（Ni²⁺）配体亲和层析柱纯化目的蛋白，其纯度为90％以上。与含有错配碱基DNA双链的结合反应证明该蛋白具有特异性识别、结合含有错配碱基DNA双链的生物活性。

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