利用大肠杆菌鞭毛展示的随机肽库筛选TNF-α拮抗肽

摘要:

TNF-α是一种在机体抗感染、抗肿瘤过程中发挥重要作用的细胞因子，其对机体具有保护和损伤两方面的作用，为了探讨新的抑制TNF-α所致炎症损伤等反应的手段，构建了细菌鞭毛递呈的随机肽库，利用构建得到的肽库，进行TNF-α特异性结合肽的筛选工作。经过5轮筛选及DNA测序，共得到6条小肽编码序列。其中2条序列中含有一V-N-WG的相同序列框架。进行6条序列与TNF-α结合力的确证后，选择了其中的4条肽序列进行人工化学合成、纯化及鉴定。利用L929细胞及MTT法对4条小肽进行活性测定，检测其对TNF-α的抑制活性。结果表明，在TNF-α对L929细胞毒性为30％左右时，含同源序列框架的2条肽可抑制90％左右的TNF-α活性。

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