兼具凝集素活性的芥菜几丁质酶BjCHI1

摘要:

利用毕赤酵母表达系统表达芥菜几丁质酶基因BjCHI1及其两个衍生基因BjCHI2和BjCHI3，获得相应的蛋白质。经FPLC纯化后，测定了3种蛋白质的几丁质酶活性，发现它们均能降解CM-chitin-RBV和胶状几丁质。以CM-chitin-RBV为底物时的Km值分别为0.799mg/mL、0.544mg/mL和0.793mg/mL，差别甚微。而以胶状几丁质为底物时的Km值分别为0.281mg/mL、0.388mg/mL和1.643mg/mL，表现一定的差别，说明几丁质结合域影响了酶对不溶性底物的亲和力。3种蛋白中，只有BjCHI1在33μg/mL以上浓度具有凝集素活性，而BjCHI2和BjCHI3的浓度即使高达800μg/mL也无凝集素活性，表明2个几丁质结合域是BjCHI1具有凝集素活性的必需条件，这是植物中发现的第一个兼有几丁质酶和凝集素活性的蛋白质。 

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