苯丙氨酸脱氨酶在乳酸乳球菌NICE系统的高效表达及其实验动物研究

摘要:

为构建苯丙氨酸脱氨酶的一种更新更高表达的基因工程菌，取得治疗高苯丙氨酸血症大鼠的更佳疗效。将欧芹PAL cDNA重组到质粒pNZ8048中，构建翻译融合载体和转录融合载体，分别转化乳酸乳球菌NZ9000。对两种高效表达菌株的酶活性差异进行比较，观察Nisin诱导的动态进程，并利用新鲜培养的p(NZ8048-PAL)₁/NZ9000工程菌进行了高苯丙氨酸血症大鼠(称PKU动物模型)的治疗实验。结果表明：（1）翻译融合型菌株具有更高的酶活性；（2）当Nisin的诱导时间达6h时, 产物肉桂酸生成量基本达到峰值；（3）给高苯丙氨酸血症大鼠灌喂新鲜培养的p(NZ8048-PAL)₁/NZ9000工程菌（翻译融合型）, 观察到该工程菌能显著降低模型动物血中Phe浓度，从而取得了更好的疗效。  

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