人源抗HBsAg单链抗体在巴氏毕赤酵母中的表达

摘要:

在P.pastoris中分泌表达非融合抗HBsAg单链抗体（HBscFv）。设计引物从pGEMHBscFv上扩增目的基因，亚克隆至P.pastoris表达载体pPICZαA中，线性化后转化P. pastorisGS115；转化子经菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定后，甲醇诱导目的蛋白表达。结果发现，重组HBscFv可以在α因子的引导下，分泌至培养基中，产量为80mg/L；分泌至培养基中的HBscFv具有结合HBsAg活性，活性总量在诱导培养72h后达最高峰，在诱导培养后期，HBscFv活性下降；PAS糖显色结果表明，酵母表达HBscFv是一种低糖基化蛋白或非糖基化蛋白。

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