摘要:为了在中药细胞中表达人源有用基因,以增强其特异药理活性,将克隆自人外周血淋巴细胞(PBL)mRNA的RANTES基因经Ti质粒衍生的中间表达载体pROKII导入携带pAL4404质粒的根癌农杆菌LBA4404菌株中,并采用叶盘共培养法转化离体培养夏枯草细胞,经Southern杂交确认RANTES基因在转化细胞基因组中的整合,用RT-PCR扩增、Western印迹杂交和酶联免疫吸附测定(ELISA)分析转化细胞中RANTES基因的表达,以PBL的过氧化物酶活性作为重组RANTES对细胞趋化性诱导的检测指标。结果表明,RANTES基因已在转基因夏枯草细胞中整合,并已形成稳定表达RANTES基因的细胞克隆,为进一步培育具有特异药理活性的转基因夏枯草植株打下了基础。