大肠杆菌ppsA和tktA基因的串联表达

摘要:

ppsA和tktA是芳香族氨基酸生物合成中心途径的两个关键酶基因，在大肠杆菌中，ppsA基因编码磷酸烯醇式丙酮酸合成酶A（PpsA），该酶催化丙酮酸合成磷酸烯醇式丙酮酸；tktA基因编码转酮酶A，该酶在磷酸戊糖途径中生成4-磷酸赤藓糖起主要作用。采用PCR方法从大肠杆菌K-12株中扩增到ppsA和tktA，并实现了两基因的高效表达，其中ppsA活性提高了10.8倍，tktA活性提高了3.9倍，当这两个基因串联在一个质粒上导入大肠杆菌进行表达时，PpsA的活性变化较大（2.1～9.1倍），TktA的活性相对稳定（3.9～4.5倍），且这两个基因单独表达和串联表达都能使芳香族氨基酸生物合成共同途径中关键中间产物DAHP的产量提高，且串联表达比单独表达较高。

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