枯草芽孢杆菌SA-22 β-甘露聚糖酶的纯化及其特性

摘要:

利用硫酸铵沉淀、羟基磷灰石柱层析、Sephadex G-75凝胶过滤和DEAE-52离子交换柱层析的方法，将枯草芽孢杆菌SA-22 β-甘露聚糖酶纯化了30.75倍，同时,该酶比活达到3478056 u/mg，收率达到23.43%。利用SDS-PAGE凝胶电泳和Sephadex G-75凝胶过滤的方法测得枯草芽孢杆菌SA-22 β-甘露聚糖酶的分子量分别为38 kD和34 kD。实验发现该酶的最适pH为6.5，在pH 5～10的范围内稳定；该酶最适温度为70℃，在50℃保温4h后其活力不变，在60℃保温4 h后剩余酶活为74.2%，70℃的酶活半衰期为3h。实验还发现Hg²⁺对酶活力有明显抑制作用。该酶对槐豆胶和魔芋胶的K_m和V_max值分别为11.30mg/mL, 4.76mg/mL和188.68(μmol·mL^-1·min^-1), 114.94(μmol·mL^-1·min^-1)。

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