金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因克隆、表达及活性试验

摘要:

利用PCR从金黄色葡萄球菌标准株（Staphylococcus aureus, ATCC13565）中克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)的基因，序列测定结果与报道完全一致。构建了表达载体pETSEA并获得高效表达，重组蛋白（rSEA）在37℃诱导时以包涵体形式存在，降低温度则出现可溶表达，可溶性rSEA占总rSEA的55%。可溶性rSEA经Ni²⁺亲和层析纯化，达电泳纯。通过同源模建对rSEA对SEA进行结构比较，结果表明尽管rSEA比野生型SEA多了9个氨基酸但其结构并没有明显的变化。单核细胞增殖试验进一步证明了该结论：将rSEA与SEA同外周血单个核细胞共同培养，两者均能有效地促进其增殖。将rSEA与体内激活的脾细胞共培养，则能增强脾细胞的体外抑瘤活性。

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