人Leptin基因的cDNA的克隆和表达

摘要:

克隆人Leptin基因的cDNA并获取表达的Leptin蛋白，为进一步研究新的Leptin相关蛋白打下基础。以人基因组DNA为模板，用引物悬挂延伸PCR法，克隆与6个组氨酸（6×His）密码子相连的人Leptin基因的cDNA，并将其克隆到体外表达载体pIVEX23MCS上，通过体外快速翻译系统(Roche公司的RTS500环状模板试剂盒和RTS500 ProteoMaster仪器)在体外表达了带有6×His的Leptin融合蛋白。经SDSPAGE及Western blot方法鉴定，融合蛋白大小正确，有172个氨基酸，分子量为1946kD，具有特异的抗原性，且主要以可溶形式存在于反应液上清中。

关键词:Leptin， cDNA克隆， 融合蛋白， 体外表达

Abstract:

Key words:Leptin， cDNA克隆， 融合蛋白， 体外表达