利用P.pastoris表达人卵透明带ZP3蛋白。设计特定引物从全长hZP3 cDNA上扩增含跨膜区序列的人卵透明带ZP3基因片段，并在N末端接上串联组氨酸编码序列的重组基因序列；扩增片段插入表达载体pPIC9K中；线性化后的重组质粒转入P.pastoris中，用高浓度G418筛选高拷贝菌株，然后甲醇诱导目的蛋白表达。用SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。结果发现P.pastoris表达的人ZP3蛋白可以分泌到培养液中，并且可溶性好。纯化前后的重组人ZP3蛋白均能与兔抗猪ZP3蛋白抗体发生交叉反应，证实表达的目的蛋白具有反应原性。
唐键 谢琪璇 潘善培 肖銮娟 董鲁 张春雪 孙彩军. 重组人卵透明带ZP3蛋白在毕赤酵母中的表达[J]. 生物工程学报, 2003, 19(6):
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