草木樨状黄芪甲硫氨酸抗性系的原生质体培养及植株再生

摘要:

建立了草木樨状黄芪(Astragalus melilotoides Pall．)甲硫氨酸抗性系原生质体再生植株的实验体系。以茎切段诱导的松软愈伤组织为材料，通过酶法分离出大量有活力的原生质体。原生质体经培养持续分裂形成了愈伤组织，并高频率地分化出再生苗。比较了不同培养基、培养方法和培养密度对原生质体分裂和再生的影响。结果表明，原生质体以3×10⁵/mL的植板密度，采用琼脂糖岛法培养在附加1．0mg／L 2,4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、0．5mg／L 6-苄氨基嘌呤(6BA)、500mg／L水解酪蛋白、3％蔗糖、0．3mol／L甘露醇的KM_8p培养基中，可获得最佳效果，其细胞分裂频率达38％左右。原生质体培养后仍然保持对甲硫氨酸的抗性，同时对乙硫氨酸表现交叉抗性。

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