摘要:系统研究了作用浓度、时间和温度以及输卵管上皮细胞和卵丘细胞对肝素处理山羊精子体外获能后的精子活力、质膜完整性、顶体完整率、获能比例及受精和卵裂的影响,为改善山羊精子体外获能效果和研究获能机理提供了必要的数据。主要实验结果如下:1、在获能液中添加5、10、25、50和100μg/mL肝素处理45min时,添加50和100μg/mL肝素精子获能比率最高(分别为55%和56%),但添加100μg/mL肝素处理后顶体完整率明显(P<0.05)低于对照组。说明山羊精子获能的最佳肝素浓度为50μg/mL。2、肝素作用时间(0, 10, 20, 30, 45, 60 和120 min)的延长,获能精子比例逐渐提高。其中,肝素处理45~120 min各组的获能精子比例差异不显著(P>0.05),处理120 min组的精子活力和质膜完整率显著低于其它各组。说明50μg/mL肝素处理精子获能的最佳时间是45~60 min。3、在42℃和38.5℃下处理时,获能精子比例显著高于15℃和37℃,但42℃处理后精子活力和顶体完整率显著低于其它温度。因此,385℃为山羊精子获能的最佳温度。4、与输卵管上皮细胞共培养获能精子比例显著高于对照组和卵丘细胞组,但精子活力、质膜完整率和顶体完整率差异不显著。输卵管上皮组的受精率(91.3%)和卵裂率(72.2%)显著高于对照组(81.2%,65.0%)。说明与输卵管上皮细胞共培养能显著提高肝素处理山羊精子体外获能的效果。