嗜铬粒蛋白N端片段基因在枯草杆菌中的表达及表达产物的活性分析

摘要:

嗜铬粒蛋白(CGA)是存在于分泌细胞的由439个氨基酸组成的可溶性蛋白。近年的研究发现CGA的N端具有抗血管收缩、抗细菌和抗真菌的功能。为了寻找高效低毒的抗真菌片段，利用PCR技术扩增了编码人嗜铬粒蛋白N端1-76位氨基酸（CGA1-76）的DNA片段，并将之克隆进本实验构建的枯草杆菌诱导型表达载体pSBPTQ，获得含CGA1-76基因的重组质粒pSVTQ，转化蛋白酶三缺陷的枯草杆菌DB403。经蔗糖诱导后，CGA1-76片段在枯草杆菌DB403（pSVTQ）中获得表达，产物分泌到细胞外，分泌量约为5mg/L，占总分泌蛋白的133% 。测试了表达产物对几种丝状真菌和酵母的抑制作用，发现在4μmol/L的浓度下，枯草杆菌表达的重组CGA1-76对镰刀菌、链格孢霉及白假丝酵母有明显的抑制作用。

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