猪α1-干扰素的基因改造与高效原核表达

摘要:

poIFNα1基因中含有大量的大肠杆菌稀有密码子，为了获得高表达，使用了大肠杆菌的偏爱密码子，人工合成了poIFN|α1成熟蛋白编码基因。在保留编码蛋白序列的同时，使其5′端A+T的含量增加到最大限度，并将其终止密码子改为TAA。将合成的poIFNα1成熟蛋白编码基因插入原核单纯表达载体pRLC中,转化大肠杆菌DH5α。实现了poIFNα1在大肠杆菌中的高效表达，表达产物以包涵体形式存在。纯化的包涵体经含DTT的6 mol/L盐酸胍的变性液溶解及含GSHGSSG的复性液复性处理，复性后的表达产物浓缩后经凝胶层析纯化，细胞病变抑制法测定表明,重组poIFNα1具有较高的抗病毒活性，约为6.4x10⁶u/mg。 

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