温和气单孢菌YH311硫酸软骨素裂解酶的分离纯化与固定化

摘要:

通过硫酸铵沉淀、QAESephadex-A50柱层析及Sephadex-G150凝胶过滤等纯化步骤，对源自温和气单孢菌YH311的ChSase进行了分离纯化。结果表明，ChSase经上述纯化步骤后被纯化了55倍，其最终纯度可达95%以上，比活为31.86u/mg。经SDSPAGE及IFE测定可知该酶的分子量约为80kD，等电点为4.3～4.8。将纯化后的ChSase用海藻酸钠或纤维素固定化后，ChSase的热稳定性及贮存稳定性均可得到大幅度的提高：固定化酶用80℃水浴处理120min或于4℃冰箱放置30d后仍可保留50%以上的相对活力；但固定化酶的收率较低，仅为18.56%和18.86%。

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