四环素-绿色荧光蛋白融合蛋白的构建及其活性测定

摘要:

将来源于水母的绿色荧光蛋白基因 (gfp)和来源于E .coli转座子Tn10的四环素阻遏蛋白基因 (tetR)共同构建到E .coli表达载体pET_30a +上 ,获得TetRC_端与GFPN_端融合蛋白。对经诱导表达并纯化后的融合蛋白 (TR∷GFP)进行荧光发射光谱分析表明 ,该融合蛋白保留了GFP的荧光特性 ,即在 395nm激发下 ,可在 5 10nm附近有特征发射峰。在加入四环素后 ,融合蛋白在 395nm激发下 ,在400nm～700nm范围内的发射光谱发生明显变化 ,荧光强度普遍增加 ,且以 510nm处最大发射峰增幅最大 ,由原来 1132增至 2214 ,而四环素对相同浓度的GFP与TetR荧光影响不大 ,结果表明该融合蛋白 ,能感受外界四环素 ,并产生一定的荧光变化。

关键词:绿色荧光蛋白（GFP）; 四环素阻遏蛋白（TetR）; 荧光光谱; 荧光强度; 融合蛋白; 四环素生物传感器;

Abstract:

Key words:绿色荧光蛋白（GFP）; 四环素阻遏蛋白（TetR）; 荧光光谱; 荧光强度; 融合蛋白; 四环素生物传感器;