搅拌式生物反应器中造血细胞的灌注培养

摘要:

为了消除造血细胞静态培养中存在的浓度梯度和搅拌悬浮培养时换液引起的波动，为造血细胞体外扩增提供更理想的培养环境和操作方式，利用自主开发的造血细胞重力沉降截留系统结合有溶氧和pH控制的生物反应器进行了脐血造血细胞的灌注培养。两次灌注培养中总细胞分别扩增11.5和18.6倍，扩增倍数最大时，CFU-Mix分别扩增23.2倍和20.4倍、 CFU-GM扩增13.9倍和21.5倍、BFU-E 扩增8.0倍和6.9倍、CD34⁺细胞扩增17.1倍和15.4倍。培养到12d时，第一次实验由267×10⁶单个核细胞扩增得到1082×10⁶个总细胞，6.31×10⁶个CFU-GM，6.2×10⁶个CFU-Mix和23×10⁶个CD34⁺细胞；第二次实验由180×10⁶单个核细胞扩增得到1.080×10⁶个总细胞，4.65×10⁶个CFU-GM，11.0×10⁶个CFU-Mix和25.0×10⁶个CD34⁺细胞，这达到了临床规模，由于控制了较低的溶氧和稳定的培养环境，细胞中干/祖细胞含量显著高于方瓶。但灌注培养到后期细胞密度达到较高后，细胞生长受到抑制，这应该是由细胞密度过高本身所引起。搅拌式反应器中进行灌注培养有利于造血干/祖细胞的进一步扩增，培养得到的细胞中干/祖细胞含量较高，培养规模达到了临床要求，但过高的细胞密度将对造血细胞的生长产生抑制。

Abstract: