猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型RTX毒素I的N-端表达多肽具有良好的免疫原性

摘要:

ApxI外毒素是猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）最重要的毒力因子，为了研究其N端多肽的免疫原性，分别将apxIA基因的全长编码区（apxIA, 3146bp）及其5′端1140bp的片段（apxIA5）克隆到原核表达载体pET-28a，经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达，表达产物ApxIA和ApxIAN均以包涵体的形式存在，Westernblot检测证实两种表达产物均具有免疫反应性。将纯化的重组蛋白（rApxIA和rApxIAN）和提取的天然毒素ApxI（nApxI）分别经腹腔免疫BALB/c小鼠，于免疫前、免疫2周和4周后分别检测了ELISA抗体和毒素中和抗体水平，结果表明，rApxIAN免疫组的ELISA抗体显著低于rApxIA免疫组和nApxI免疫组，但rApxIAN免疫组血清中和试验中测定的溶血素单位与rApxIA及天然nApxI免疫组没有显著差异。第二次免疫2周后，用1个LD50的APP血清1型J101株和2型标准菌株攻击试验动物，rApxIAN免疫组对血清1型和2型菌株的保护率分别为80％和100％。

Abstract: