重组CHO-GS细胞降低氨毒副作用的代谢研究

摘要:

在重组CHO-GS细胞无血清批培养过程中，由于GS系统的引入，使氨对细胞的毒副作用显著降低，从而引起细胞生长和代谢途径发生变化。当起始氨浓度为1.42mmol/L时，细胞最高密度可达到15.6×10⁵ cells/mL，随着氨浓度的增加，尽管细胞生长受到一定的抑制，但在氨浓度为12.65mmol/L时，细胞密度仍可达到8.9×10⁵ cells/mL。当起始氨浓度从0.36mmol/L增加到12.65mmol/L时，细胞对葡萄糖的得率系数和乳酸对葡萄糖的得率系数降低，己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）和乳酸脱氢酶（LDH）酶活分别提高了43%、140%和25%，表明细胞对葡萄糖的利用增加，糖代谢更倾向于高能量生成途径。在谷氨酰胺代谢途径中，氨促进了谷丙转氨酶(GPT)酶活，谷氨酸到α-酮戊二酸的转化逐渐倾向于谷丙转氨途径，谷氨酸脱氢酶（GDH）酶活降低，脱氨途径相应受到抑制。此外，氨浓度的增加使细胞群体处于G₀/G₁期的比例逐渐升高，当氨浓度为12.65mmol/L时，重组蛋白比生产速率比氨浓度为0.36 mmol/L时提高了2.1倍。

Abstract: