诱导相温度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素聚合的影响

摘要:

研究了Pichia pastoris表达重组人复合α干扰素（Cifn）时诱导期温度对Cifn形成聚合体的影响。在5L罐上考察毕赤酵母在不同温度（30、25、20℃）下诱导时菌体生长和Cifn表达的差异，发现毕赤酵母在20℃下菌体生长不受影响，总蛋白表达量有所降低，相当于30℃发酵时胞外总蛋白的678%。但是通过非还原性电泳、NativePAGE及Western blotting分析发现较高温度（30℃）诱导表达时，分泌到胞外的Cifn容易形成聚合体，单体含量很少。诱导相控制温度为20℃时，明显降低了Cifn聚合体的形成，Cifn单体量为570mg/L，发酵上清液抗病毒活性为1.05×10⁹IU/Ml。与控制诱导相温度为30℃相比，Cifn单体量提高了7.2倍，发酵上清液中单位体积的Cifn抗病毒活性提高了38.7倍。

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