来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因在衣藻叶绿体中的表达

摘要:

来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶是一种重要的酒精工业用酶，在植物中表达耐高温α-淀粉酶可以大大降低用植物秸秆生产酒精的成本。选择衣藻叶绿体基因组同源片段clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2和壮观霉素抗性基因，构建了来源于Pyrococcus furiosus的耐高温α-淀粉酶基因的衣藻叶绿体表达载体P64a。通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中，经壮观霉素抗性(100mg/L)筛选，获得了9 个抗性衣藻转化子。转化子经过抗性继代筛选后，经PCR、Southern blot 检测分析及暗培养，证实耐高温α-淀粉酶基因已整合到衣藻叶绿体基因组中并得到表达。酶活性检测表明，转基因衣藻表达产物具有耐高温α-淀粉酶活性，每克鲜重衣藻最高达77.5u。 实验结果证明在植物叶绿体中表达工业酶制剂是可行的。

Abstract: