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利用长引物嵌套式反向PCR方法克隆雅致枝霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列
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摘要:
用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ分别对雅致枝霉As32806基因组DNA进行消化，而后在低浓度条件下利用T4DNA连接酶使DNA自身环化。根据已知基因序列，设计一对长度为35nt的长反向引物和两对较短的引物，以基因组连接产物为模板，通过三轮嵌套式PCR反应，获得一长度约为4kb的扩增片段。经序列测定表明得到了Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列约为1.3kb，初步序列分析显示该序列为一潜在的启动子序列。
引用本文
王德培 孙伟 李明春 魏东盛 张颖慧 邢来君. 利用长引物嵌套式反向PCR方法克隆雅致枝霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因上游序列[J]. 生物工程学报, 2006, 22(4):
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