柑橘衰退病毒多克隆和单克隆抗体的制备及检测效果分析

摘要:

通过改进提纯方法获得了柑橘衰退病毒（Citrus tristeza virus，CTV）的提纯液，其产量为1mg/100g植物组织。用CTV免疫大耳白兔，获得多克隆抗体，间接ELISA效价为1∶25 600。用CTV免疫小鼠，经细胞融合、ELISA筛选和克隆化培养，获得18株能稳定分泌抗CTV单克隆抗体的杂交瘤单细胞株。对其中4株单克隆腹水抗体进行分析的结果表明，这些抗体的ELISA效价为1∶51 200～1∶204 800，其中2G和3H的抗体类型及亚类为IgG2a，1E和4H为IgG2b。用所制备抗体对不同来源柑橘样品的CTV检测结果显示，单克隆和多克隆抗体结合使用，采用三抗体夹心ELISA（TASELISA）可以获得理想的检测效果，其特异性强、灵敏度高。同时发现所分析4株单克隆抗体对不同的CTV分离物鉴别能力存在差异，但有关这些CTV分离物的特性及其血清学关系还需进一步研究。

关键词:柑橘衰退病毒，多克隆抗体，单克隆抗体， 三抗体夹心ELISA

Abstract:

Key words:柑橘衰退病毒，多克隆抗体，单克隆抗体， 三抗体夹心ELISA