五指山猪近交系精原干细胞体外培养研究

摘要:

对不同发育阶段五指山小型猪（WZSP）近交系的睾丸组织，采用不同的消化和培养方法进行了一系列的探索、研究。实验显示： 培养SSCs 的最佳时限为仔猪出生后1～20日龄；对不同日龄仔猪采用不同消化方法,以DMEM为基础培养液并添加不同成分，34℃，5％CO2培养箱中饱和湿度条件下培养，可获得较好的分离培养结果；原代SSCs在培养8d后，SSCs开始增殖，桑椹状的SSCs集落半悬浮隆突生长；SSCs集落AKP染色，细胞呈阳性反应；对SSCs细胞团在STO饲养层上进行传代培养，SSCs贴壁良好，培养4d左右大部分SSCs集落和单细胞消失；采用曲精细管组织贴壁培养法也同样获得桑椹状SSCs集落，细胞集落在培养5d后出现，半悬浮生长。此外，睾丸组织在4℃PBS液中存放24h后，仍可作为SSCs分离、培养的材料。结果表明：本研究初步掌握了WZSP近交系精原干细胞体外分离、培养的技术方法，为其进一步深入研究提供了技术方法和操作依据。

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