来源于线虫Caenorhabditis briggssae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因

摘要:

ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFAs）是一类被广泛研究和关注的脂肪酸，对人类及其他哺乳动物的正常发育和保持良好的健康状况极其重要，并且对于人类的多种疾病的预防和治疗亦有着明显的作用。在人和哺乳动物体内，ω-3 PUFAs的含量与ω-6 PUFAs（其代谢方式和功能与前者不同，通常其作用也相反）相比很低。而对于人体，无论ω-3 PUFAs的过低还是ω-6 PUFAs的过高都会带来极为不利的影响。所以人们一直在努力寻求提高人体中ω-3 PUFAs含量的途径或者大量生产ω-PUFAs的方法。本研究经过密码子优化后，用化学合成的方法获得了C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1，并构建了哺乳动物细胞表达载体pcDNA31-sFat1-EGFP，通过脂质体转染了CHO细胞系并对其进行抗性筛选获得稳定转染细胞株。对稳定转染sFat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的GC-MS分析表明，sFat1基因完全能够在CHO细胞中表达和发挥其ω-3去饱和酶的作用，即促使ω-6系列不饱和脂肪酸转变为相应的ω-3系列不饱和脂肪酸（从十八碳到二十二碳）。Ω-6不饱和脂肪酸总量从48.97%下降到35.29%，而ω-3不饱和脂肪酸总量则相应地从7.86%上升到24.02%。Ω-6多不饱和脂肪酸和ω-3多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.23下降到转染细胞中的1.47。这说明C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1的合成是成功的，试验所获得的结果为今后的进一步的研究或应用其大量生产ω-3PUFAs奠定了基础。

Abstract: