摘要:PAC2是垂体腺苷酸环化酶激活多肽（Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide，PACAP)和血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP)的共同受体，介导多种重要生物学功能。为获得稳定特异表达VPAC2的中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary, CHO）细胞，将pcDNAVPAC2表达载体转染CHO细胞，G418筛选转染阳性克隆，PACAP38标准品诱导阳性克隆细胞的胞内cAMP生成，筛选出对PACAP38最为敏感的阳性单克隆细胞株（VPAC2-CHO），运用RT-PCR、Western blot和免疫荧光法检测VPAC2受体表达情况，利用VPAC2受体特异激动剂通过竞争性结合试验和促进胞内第二信使cAMP生成的活性检测实验证实， VPAC2-CHO特异表达有功能的VPAC2。Scatchard作图分析显示VPAC2-CHO的VPAC2受体密度为(1.1±0.2)pmol/mg膜蛋白，PACAP38与VPAC2的解离常数Kd值为(0.55±0.10)nmol/L。特异表达VPAC2受体细胞系的构建为深入研究该受体理化性质、生物学功能以及筛选、开发VPAC2受体新型特异激动剂和拮抗剂等研究奠定了基础。
