以Tac为启动子构建了牛凝乳酶原B基因表达质粒pTaAc,转化大肠杆菌JMl05,对数生长期加入O.1mmo1/L IPTG能明显诱导凝乳酶原的产生。基因表达除受IPTG的影响外,也受温度的调节控制。在30℃培养,IPTG存在时,凝乳酶原产量极低j在42℃无IPTG的条件下,基因也能表达。按电泳扫描计算凝乳酶原蛋白占细胞可溶性总蛋白量的12~19%,按ELISA法测定凝乳酶原产量为80~100mg/L,经变性、复性及酸化有活性的凝乳酶产量为14—20mg/L。
张渝英 周炜 刘年娟 杨开宇. 牛凝乳酶原基因在大肠杆菌中的表达[J]. 生物工程学报, 1991, 7(3):
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