玉米醇溶贮藏蛋白基因启动子PCR扩增及其驱动GUS基因在转基因烟草种子中的表达

摘要:

以玉米(Zea mays L.)黄化苗为材料，利用PCR技术扩增了玉米19kDa醇溶贮藏蛋白基因(zein)起始密码子上游启动子片段，序列分析结果表明，克隆的-1～-694片段具有19kDa zein启动子特点，与同一家族中其它基因的对应区段同源性达90％以上。将此启动子插入pPKGT的GUS基因及NOS终止子上游构成表达载体。经农杆菌转化烟草(Nicotiana tabaccum Var.samsum)，得到了转化植株。转化的烟草的PCR扩增及Southern杂交证明目的片段已整合到烟草基因组中。转基因植株的GUS活性检测表明，在叶、根中无GUS活性，GUS活性只存在于种子中。转基因植株烟草种子经冷冻切片，GUS底物Xgluc活体组织染色证明GUS活性只存在一层介于种子胚乳与种皮之间的细胞中。

关键词:玉米醇溶贮藏蛋白基因，启动子，烟草，GUS，PCR

Abstract:

Key words:玉米醇溶贮藏蛋白基因，启动子，烟草，GUS，PCR