中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS-7细胞中的表达

摘要:

利用PCR技术。以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板，进行了基因修补和重组．克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异，导致第62位氨基酸是丝氨酸．不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点，构建了6种不同的转移载体质粒，即psV2 dhfr／F1，pSV2／F2，pSV2 dbfT／F3，pSV2 dhfr／F4，pSV2-dhfr／G1和psV2 dhfr／G3。将它们分别转染导人COS-7细胞，结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。

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