摘要:三亲交配方法分别将载有褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)呈组成型表达的nifAC的质粒pCK5和肺炎克氏杆菌(Kldosiella pneumoniae)含有nifAc和nifA—ntrc基因的质粒pcK3.pSZ36和pSZ23-CA导入根癌土壤杆菌Agrobacterium tumefaciem)C58/pGV3850,所得转移接合子的生长速率和野生型相似。在10mmol/L,NH4+浓度下,Western blotting测出A.Tumefaciens C58/pGV3850(pCK5)有固氮酶合成,乙炔还原法测定固氮酶活性恢复分别为73%.24%,11%和62%。这些结果表明,褐球固氨菌和肺炎克氏杆菌的固氮调节基因对土壤杆菌同氮基因表达有调节作用。其中.褐球固氮菌nifAc的调节功能最强(73%),其次是肺炎克氏杆菌nifA和nrrC的融合子(62%),肺炎克氏杆菌nifAc的调节功能较弱(24%。11%)。