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RAPD技术在抗生素生物合成基因克隆表达中应用的研究
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摘要:
抗肿瘤抗生素c-1027具有极强抗肿瘤活性．其分子结构由一个酸性蛋白和脂溶性发色团构成，本文首次将RAPD技术(随机扩增的多态性DNA技术)运用于抗生素生物合成基因克隆表达研究。采用7种引物对5种C-1027无活性阻断变株总DNA进行扩增．其中引物GA2扩增C-1027原株及阻断变株后，琼脂糖凝腔电泳结果表明，F2DNA片段存在于原株而在变株AF67中缺失，采用载体质粒pU459将该DNA片段F2克隆至变铅青链霉菌．获得含重组质粒pIF2的菌株No155。No155菌株和无括性阻断变株AF67共培养后，发酵产物恢复了抗菌活性及抗瘤作用。SDS-PAGE及紫外光谱证实产物为C-1027。这表明F2DNA片段古有编码C-1027生物合成的基因。
引用本文
毛晓华 李元 石莲英. RAPD技术在抗生素生物合成基因克隆表达中应用的研究[J]. 生物工程学报, 1997, 13(2):
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