连续自由流电泳的研制和应用于分离蛋白质和细胞

摘要:

连续自由流电泳(Continuous free-flow dectrophoresis，CFE)自1980年起有了相当大的发展，其主要特点是将只能分析少量物质(1μg)的分析型电泳转变成能分离lg左右物质的制备型电泳，以达到分离和纯化各种生物产品目的^[1]。近年来CFE广泛应用于蛋白质和细胞分离，是一种很有前途的制备级电泳方法^[2,3]。在连续自由流电泳中，一种恒定pH称为载体缓冲液的液体．沿垂直方向缓慢流过一矩形的电泳薄腔，电泳腔的两侧是电极室，能被横向地加上直流电场，欲分离的蛋白质混合物通过一根细管从样品入口处连续注入腔体，随缓冲液措径向流动，同时又向与液流垂直的方向迁移．每种蛋白质的侧移距离与它的泳动率、电场强度及它在分离腔中的保留时间成正比。在分离腔出口处，混合物中各种蛋白质根据它们的泳动率被分配在各股液流中并由腔体出口处的一组收集管收集。但是有许多次级现象能损害连续自由流电泳的分离结果，诸如沉降效应、电渗流、焦尔热和自然对流。本文报道了仪器的研和我们对模型蛋白分离条件进行了优化，并成功地将人和兔的红细胞分开。

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