用黄连幼叶切块,接种在含1.0~2.0mg/L 2,4-D和0.1mg/LKT的6.7-v固体培养基上,诱导形成愈伤组织。选择较松散的愈伤组织转入液体悬浮培养,获得游离细胞和细胞聚集体。通过平板培养和细胞株的筛选.选择小檗碱含量较高的细胞株。经35次转代培养后,进行固体、液体培养。收集悬浮培养细胞进行化学提取和分离,获得黄色晶体,经TLc、UV、IR、MS鉴定分析为小檗碱,与天然植物提取分离的小檗碱具有相同的生理活性。
毛堂芬 颜谦 方周伯 沈永珍. 黄连细胞培养物中小檗碱的分离与鉴定[J]. 生物工程学报, 1997, 13(3):
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