含par位点的重组质粒Psjm3的构建及其稳定性研究

摘要:

利用自然质粒pSC101par位点的分离稳定性功能，构建了含par位点的质粒pSJM4和pSJM3，通过在同样宿主E.coli HB101中的稳定性比较研究表明，不含par位点的重组质粒pSJ3很不稳定，E.coli G3(pSJ3)在培养到第10代时已开始出现pSJ3的丢失，到培养至50代时则已全部丢失；而含par位点的重组质粒pSJM3则表现得十分稳定，E.coli G3-1(pSJM3)经70代培养，仍无明显的质粒丢失现象，其稳定率保持97%以上。通过对不含par和含par的非重组质粒pUC18和pSJM4的稳定性比较也获得同样的结果。通过对E.coliG3(pSJ3)和E.coli G3-1(pSJM3)的产酶活性比较研究表明，G3-1菌株明显高于G3菌株，说明我们构建的重组质粒pSJM3上的par位点功能不仅没有因外源基因的表达而受影响，而且有利于外源基因的表达。

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